TALENS 동물 모형

협상 가능업데이트03/04

모델

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개요

탈렌스 동물 모델 구축은 탈렌스 유전자 편집 기술을 활용해 구축한 실험동물 모델이다.TALENS는 인자 샘플 효과물 (TALE) 을 활성화하는 DNA 결합 구조역과 핵산 효소 (FokI) 의 절단 구조역을 융합하여 전사함으로써 목표 DNA 서열을 특이적으로 식별하고 절단할 수 있어 게놈의 정확한 편집을 실현할 수 있다.

제품 정보

TALENS 동물 모형

1. TALENS 기술원리와 핵심돌파

(1) 구조 설계와 역할 메커니즘

TALENS(Transcription Activator-Like Effector Nucleases)는인공 공정화 핵산 효소, 두 부분으로 구성:

DNA 인식 도메인(TALE 단백질)：

부터아미노산의 중복 유닛 34개구성, 각 유닛 통과12, 13위의 가변 아미노산(RVDs)특이성은 단일 염기를 식별합니다.

RVD 유형	염기 를 식별 하다	결합 강도
NI는	A	고특이성
NG는	T	고특이성
HD	C	고특이성
NN	G/A	교차 식별

식별 시퀀스 길이는 일반적으로15-20 bp, 표적 wei 일성을 확보한다.

DNA 절단 영역(FokI 핵산 효소)：

필요 형성이중합체DNA를 절단할 수 있기 때문에 TALENs는 쌍으로 설계되어야 합니다 (왼쪽 오른팔). 절단 위치는 두 팔 사이에 있습니다 (일반적으로 12-20 bp).

(2) 유전자 편집 메커니즘

이중 체인 분리(DSB)：

TALE은 표적 시퀀스 → FokI 이중화 → DNA 이중 체인을 절단합니다.

경로 수정：

비동원 끝 연결(NHEJ): 임의의 삽입/누락(Indels)으로 인해 유전자가 제거됩니다.
동일 소스 방향 조정(HDR): 정확한 삽입 또는 점 돌연변이를 위해 외부 소스 수정 템플릿을 제공해야 합니다.

기술적 돌파:shu 회 구현모든 게놈 비트의 정확한 절단과 탈과녁률이 초기 ZFN 기술보다 낮습니다.

2.TALENS 동물 모형구축 프로세스

(1) 표준화 작업 절차

(2) 핵심 기술 최적화

단계	핵심 운영	혁신 방안
표적 설계	반복 시퀀스/메틸화 영역을 피하고 간격을 14-18bp로 최적화	소프트웨어 예측(TALEN Targeter) 성공률 향상
모듈 조립	Golden Gate 클론법：

6 모듈 직렬 연결 (+63 아키텍처)
효소 절단 연결(BsaI/BsmBI) ⑥ 6일 이내에 구축 완료, 효율 5배 향상
|표현 캐리어▲ 포유류 이중 시동자 캐리어 (CMV/T7), 세포 전염과 mRNA 합성 지원 ▲ 다종 응용 프로그램 적합 (제브라피시, 생쥐, 인간 iPS 세포) ▲
|활성 검증○ 효모 단일 교잡 시스템 또는 세포 보고 유전자 검사 ○ 대체 소요 시간 ES 세포 표적, 주기가 1 주로 단축
|배아 배달수정란 현미경 주사:
mRNA: TALENS 체외 전사 산물
RNP 복합체: TALE-FokI 단백질 복합체

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