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CRISPR/Cas12b는(원칭C2c1은) 에 속함Class 2 Type V-B CRISPR 시스템는 Cas9 및 Cas12a에 이어 중요한 유전자 편집 도구입니다.핵심 특징은 다음과 같습니다.
이중 RNA 부팅 메커니즘:
필요crRNA는및tracrRNA는(sgRNA로 융합 가능) 공동으로 표적 절단을 유도하며 Cas9과 Cas12a의 일부 특성을 겸비한다.
컷 모드:
단일RuvC 패브릭 도메인이중 체인 DNA 절단, 형성5-6 nt의 점성 끝(5'강조), 동원 재조합 수리 (HDR) 에 유리하다.
PAM 인식:
의존T-rich PAM 시퀀스(예: 5'-TTN-3') 는 AT 리치 게놈의 편집 능력을 확장합니다.
| 특징 | Cas12b는 | Cas9/Cas12a 비교 |
|---|---|---|
| 단백질 크기 | 약 1100 아미노산(최소) | Cas9(1600aa) 및 Cas12a(1300aa)보다 작음 |
| RNA 요구 사항 | 필요 crRNA + tracrRNA (sgRNA로 융합 가능) | Cas12a(crRNA만 해당)보다 복잡하지만 Cas9보다는 단순화 |
| 열 안정성 | 온도 민감형(40 – 55 ℃ 활성화) | 포유동물 세포에 적합하도록 공정화 개조가 필요하다 |
낮은 탈과녁률:
GUIDE-seq 테스트에서 탈과녁률 표시Cas9보다 크게 낮음(오류 삽입 / 누락 감소 > 50%).
고특이성:
crRNA 부팅 시퀀스가 더 길고 (> 42nt), 표적 정밀도가 더 높습니다.
편집 모드:
유도순삽입 돌연변이율 낮음, 작은 부분의 결핍을 발생시키고 기능의 예측불가능성을 감소시키는 경향이 있다.
바이러스 캐리어 적합성:
소분자량은 포장하기 쉽다AAV 또는 느린 바이러스 캐리어, 체내 배달 효율을 높인다.
| 매개변수 | Cas12b는 | Cas9는 | Cas12a는 |
|---|---|---|---|
| PAM 시퀀스 | 5'-TTN-3'(T 리치) | 5'-NGG-3'(G 리치) | 5'-TTTV-3'(T 리치) |
| 절단 끝 | 黏性末端(5' 突出) | 플랫 끝 | 黏性末端(5' 突出) |
| 반절단 활성 | ❌ 없음 | ❌ 없음 | ✅ 지원 (절단 가능한 ssDNA) |
| 다중 유전자 편집 | 필요 많은 sgRNA | 필요 많은 sgRNA | ✅ crRNA 어레이 지원 |
주: Cas12b 컷 모드에서유전자 치료에서 새로운 표위가 생기지 않도록 하고 면역위험을 낮춘다.
항바이러스 치료:
HIV는: T세포에서 한 번에 편집하면 전염성 HIV를 모두 제거할 수 있어 Cas9보다 효율적이다.
유전병 회복:
통합 HDR 채널 구현베타-지중해 빈혈 유전자 정밀 복원헤모글로빈은 정상 수준으로 회복됐다.
종양 면역:
편집PD-1/CTLA-4 이중 표적, CAR-T 세포 고갈을 줄입니다.