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CRISPR/Cas12b 시스템 실험

협상 가능업데이트03/04
모델
제조업체의 성격
생산자
제품 카테고리
원산지 Place of Origin
개요
CRISPR/Cas12b 시스템 실험: CRISPR/Cas12b(구 C2c1)는 Class 2 Type V-B형 CRISPR 시스템에 속하며 Cas9과 Cas12a에 이어 중요한 유전자 편집 도구이다.
제품 정보

1. 분자 메커니즘과 구조 특성

(1) 시스템 정의 및 분류

CRISPR/Cas12b는(원칭C2c1은) 에 속함Class 2 Type V-B CRISPR 시스템는 Cas9 및 Cas12a에 이어 중요한 유전자 편집 도구입니다.핵심 특징은 다음과 같습니다.

  1. 이중 RNA 부팅 메커니즘

    • 필요crRNA는tracrRNA는(sgRNA로 융합 가능) 공동으로 표적 절단을 유도하며 Cas9과 Cas12a의 일부 특성을 겸비한다.

  2. 컷 모드

    • 단일RuvC 패브릭 도메인이중 체인 DNA 절단, 형성5-6 nt의 점성 끝(5'강조), 동원 재조합 수리 (HDR) 에 유리하다.

  3. PAM 인식

    • 의존T-rich PAM 시퀀스(예: 5'-TTN-3') 는 AT 리치 게놈의 편집 능력을 확장합니다.

(2) 구조적 이점

특징 Cas12b는 Cas9/Cas12a 비교
단백질 크기 약 1100 아미노산(최소) Cas9(1600aa) 및 Cas12a(1300aa)보다 작음
RNA 요구 사항 필요 crRNA + tracrRNA (sgRNA로 융합 가능) Cas12a(crRNA만 해당)보다 복잡하지만 Cas9보다는 단순화
열 안정성 온도 민감형(40 – 55 ℃ 활성화) 포유동물 세포에 적합하도록 공정화 개조가 필요하다

2. 기술적 우위와 성능

(1) 핵심우세

  1. 낮은 탈과녁률

    • GUIDE-seq 테스트에서 탈과녁률 표시Cas9보다 크게 낮음(오류 삽입 / 누락 감소 > 50%).

  2. 고특이성

    • crRNA 부팅 시퀀스가 더 길고 (> 42nt), 표적 정밀도가 더 높습니다.

  3. 편집 모드

    • 유도순삽입 돌연변이율 낮음, 작은 부분의 결핍을 발생시키고 기능의 예측불가능성을 감소시키는 경향이 있다.

  4. 바이러스 캐리어 적합성

    • 소분자량은 포장하기 쉽다AAV 또는 느린 바이러스 캐리어, 체내 배달 효율을 높인다.

(2) 동종 시스템과 비교

매개변수 Cas12b는 Cas9는 Cas12a는
PAM 시퀀스 5'-TTN-3'(T 리치) 5'-NGG-3'(G 리치) 5'-TTTV-3'(T 리치)
절단 끝 黏性末端(5' 突出) 플랫 끝 黏性末端(5' 突出)
반절단 활성 ❌ 없음 ❌ 없음 ✅ 지원 (절단 가능한 ssDNA)
다중 유전자 편집 필요 많은 sgRNA 필요 많은 sgRNA ✅ crRNA 어레이 지원

: Cas12b 컷 모드에서유전자 치료에서 새로운 표위가 생기지 않도록 하고 면역위험을 낮춘다.


3. 응용 장면과 최첨단 사례

(1) 생물의학응용

  1. 항바이러스 치료

    • HIV는: T세포에서 한 번에 편집하면 전염성 HIV를 모두 제거할 수 있어 Cas9보다 효율적이다.

  2. 유전병 회복

    • 통합 HDR 채널 구현베타-지중해 빈혈 유전자 정밀 복원헤모글로빈은 정상 수준으로 회복됐다.

  3. 종양 면역

    • 편집PD-1/CTLA-4 이중 표적, CAR-T 세포 고갈을 줄입니다.