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상해시 금산구 풍경진 환동일로 65롱2호 3463실
상해통울생물과학기술유한회사
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상해시 금산구 풍경진 환동일로 65롱2호 3463실
세포 이름: moc1/moc2 생쥐구강 비늘형 세포암
세포품계:C57BL / 6 Cxcr3 - / -
세포 출처:국외
세포 검사:STR 인증 통과
세포 형태:림프모 다각형 세포 샘플, 밀착 + 부상 생장
배양기:DMEM(NaHCO3 1.5g/L 포함)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1% 500ML.
배양 조건: 기상 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 섭씨 37도, 배양함 습도 70~80%
세포 배경:구강비늘세포암(OSCC)은 두경부암의 돌출된 서브집합으로, OSCC 발생의 주요 위험요인은 발암물질 노출로, 두경부암의 이 아군을 인간종양 바이러스가 유도하는 두경부암과 구분한다.그러나 OSCC의 예후는 수십 년 동안 안정세를 유지해 발병률과 사망률을 증가시켰다.
세포 용도:과학 연구에만 사용
주의사항
1. MOC1 세포는 특히 활성도가 높고 부가가치 속도가 매우 빨라 전대 밀도가 너무 높은 것을 권장하지 않고 묽은 것을 골라 다시 깔고 80% 정도 자라 전대할 때 소화가 어려워 배양함에 놓아 소화하며 3~4분 정도 지나면 꺼낸다
2. MOC2 세포 밀착성은 일반 세포와 유사하며 특별히 견고하지 않습니다.배증 주기도 MOC1보다 빠르지 않다.일반적인 소화 방법으로 처리하다.
3.배양그릇의 옆쪽에 두드려 세포의 탈락을 돕는다. 두드리는 과정은 약 2분 정도 지속되어야 대부분의 세포가 탈락한다. 만약 탈락 비율이 아직 많지 않다면 배양함에 다시 넣어 1~2분 정도 더 소화한 후 다시 꺼내 두드려 탈락시킬 수도 있다. 80~90% 의 세포가 모두 탈락한 후 소화를 종료하고 원심이 무거운 상태에서 다시 병을 깔아 균일하게 분산시킬 수도 있다.
상온 발송
받은 후T25병 소독 재배치 배양함 정지 2~3시간 후 밀도와 상태를 관찰해 2~3장 사진을 찍어 판매에 피드백하면 밀도가 기준에 도달하면 대물림할 수 있다.전기의 전대 비율 1: 2, 재차장이 후대를 가득 채울 때 그 중 한 병을 1ml의 냉동 보관관으로 동결하고, 다른 한 병은 계속 전대하며, 2-3마리를 반복적으로 동결한 후에야 증폭하여 실험을 하여 돌발 상황이 단종을 일으키는 것을 방지할 것을 건의한다.
드라이아이스 배송
일반 세포 출하 냉동 보관관2마리, 소생 1마리, 다른 한 마리는 예비, 개 소생이 성공하지 못할 때는 엄격히 공장의 요구에 따라 소생 두 번째, 모두 소생 성공이 없는 상황은 즉시 소생 사진을 남겨 우리에게 통지한다.
밀착세포
1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온을 함유하지 않은PBS 윤세세포 1~2회.
2. 가입0.25%(w/v) T75병 2-3mL), 37℃ 배양상자에 넣어 1~2분(소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음),
그런 다음 현미경 아래에서 세포의 소화 상태를 관찰하고, 만약 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락한다면, 신속하게 조작대로 가져가 배양병을 몇 번 가볍게 두드린 후 넣는다3-4ml는 소화를 중지하기 위해 10% FBS의 배양기를 포함한다.
3. 가볍게 골고루 쳐서 빨아들이고,1000RPM 조건에서 원심 3-5min, 상청액을 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 골고루 분다.세포현액을 1:2 비율로 새 T25병/6cm 배양접시에 나누면 후속 전대는 실제 상황에 따라 1:2~1:5 비율로 진행된다.
4. 세포 동존: 세포를 받은 후 배양 전 3세대에 일련의 세포 종자를 동결하여 후속 실험에 사용할 것을 건의한다.
5. 운송용 배양기(관액배지) 세포를 배양하는 데 더 이상 사용할 수 없습니다. 설명서 세포배지 조건에 따라 새로 배합한 배지로 바꾸어 세포를 배양하십시오.
부유세포
부상상태에서 생장하는 세포는 배양병에 배양기를 첨가하여 세포의 생장상태를 유지할수 있으며 일반적으로 세포밀도는1 × 10 ~ 1 × 10 ⁶개 / mL (세포마다 밀도에 대한 요구가 다름) 은 세포의 정상적인 성장을 유지할 수 있다.만약 분병이 필요하다면 세포현액을 원심관 중 1000rpm, 원심 5min에 수집하여 상청을 버리고 1-2mL의 배양액을 보충한 후 중현을 혼합한 후 세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병에 나누고, 6-8ml의 설명서에 따라 배치한 새로운 배양기를 첨가하여 세포의 성장 활력을 유지하며, 후속 전대는 실제 상황에 따라 1:2~14의 비율로 진행할 수 있다.
생물안전
1. 모든 동물 세포는 잠재적인 생물 위해성이 있는 것으로 간주되며, 반드시 2급 생물 안전대 내에서 조작해야 하며, 모든 폐액 및 이 세포에 접촉한 그릇은 멸균한 후에야 버릴 수 있도록 주의해 주십시오.
2. 동존세포를 소생시킬 때는 항상 보호장갑, 옷, 보호면 착용을 권장한다.주의: 냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출되고 서서히 액체 질소로 가득 찰 수 있습니다.해동 시 액체 질소가 기상으로 전환되어 용기가 폭발하거나 위험력으로 뚜껑을 불어 떨어뜨려 날리는 부스러기가 발생하여 인명 피해를 줄 수 있다.
