AKR 세포

제품명:AKR 세포

AKR 세포사후 처리

세포를 배양병에서 좋은 상태로 배양한 후 배양액을 가득 채우고 병 입구를 봉하는 것은 세포를 운반하는 방법이다.세포를 받아서 자기 실험실로 돌아가면 겉포장부터 풀고75% 의 알콜을 병 전체에 뿌려 소독한 후 초정대 안에 넣고 무균 조작을 엄격히 한다，배양함 정지2-4시간. 거울 아래 관찰: 초과하지 않음80% 합류 시 병에 든 배양액원심관에 수집중, 가입6ml 배양기, 넣기37℃, 5% CO2 부화상자 배양;80% 의 합류도를 초과할 경우 상황에 따라 전대 또는 동존하며 구체적인 조작은 세포배양절차를 보아야 한다.（주의해서 발송하는 것은 밀봉배양병이라면 배양함에 넣어 배양하는 것을 기억하고 배양병 뚜껑을 느슨하게 짜서 전대 후에 한 병은 원병 안의 배양기를 사용하고 다른 한 병은 자신이 배양한 배양기를 사용하는 것을 건의한다）

AKR 생쥐 식도암세포배양 절차

하나,소생세포: 포함세포현액 1mL의 동존관은 37℃ 수욕에서 빠르게 흔들어 해동하고 배지 5mL를 넣어 골고루 섞는다.1000RPM 조건에서 원심 5분 동안 맑은 액체를 버리고 보충4-6mL배양기 뒤에 고르게 불다.그런 다음 모든 세포 현액을 배양병에 넣고 밤을 새워 배양합니다 (또는 세포 현액을 넣습니다6cm 그릇 중）밤새도록 키우다.다음 날 환액하고 세포밀도를 검사한다.

2.세포 전대: 세포 밀도가 높으면80~90% 로 대물림할 수 있다.

a), 밀착 세포의 경우, 전대는 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다:

1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

2. 더하기1-소화액 2ml(0.25% Trypsin-0.53mM EDTA) 배양병에 37 ℃ 배양함에 넣어 소화1-2분그런 다음 현미경 아래에서 세포의 소화 상태를 관찰하고, 만약 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락한다면, 신속하게 조작대로 가져가 배양병을 몇 번 가볍게 두드린 후 추가한다5ml 이상함10% 혈청의배양기가 소화를 중지하다.

3.세포를 가볍게 불어 떨어뜨린 후 흡출, 1000RPM 조건에서 8~10분 원심분리, 상청액을 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 고루 분다.

4. 누르기5-6ml/병에 배양액을 보충하여 세포현액을 1:2의 비율로 새로운 함유량으로 나눈다5-6ml 배양액의 새 그릇이나 병 속.

b)）、대상부유세포, 전대는 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다.

방법 1: 세포를 수집하고,1000RPM 조건에서 8~10분 동안 원심을 분리하고 맑은 액체를 버리고 1-2ml 배양액을 보충한 후 골고루 불어 세포현액을 1: 2에서 1: 5의 비율로 8ml 배양기를 함유한 새로운 그릇이나 병에 나눈다.

방법 2: 반수 환액 방식을 선택할 수 있으며, 반수 배양기를 버린 후, 남은 세포를 매달아 세포를 매달아1: 2에서 1: 3의 비율은 새로운 8ml의 배양기를 함유한 새 그릇이나 병에 나뉜다.

PS :고객이 받은 경우2ml 소관세포는 세포를 받은 후 75% 의 알코올로 전체 관을 뿌려 소독한 후 초정대나 안전궤에 넣어 무균 조작을 엄격히 한다;소관 세포를 T25 배양병 또는6cm배양그릇,첨가5ml 좌우 배지 혼합, 배지 상자에 넣고 밤새 배지 후 세포 밀도 보기: 밀도가 초과되지 않으면80%, 환액은 계속 배양하고 상황에 따라 대물림 또는 동존한다.밀도가 초과되면80%, 직접 전대를 진행할 수 있다 (방법은 상기와 같다).

셋,세포 동존:（주: 무혈청 동존액 동존세포의 방법은 우리 회사 화물번호를 참고하세요:C7001은）

1、세포는 배양병을 덮는80% 면적일 때 25cm2 배양병의 배양액을 버리고 PBS로 세포를 한 번 세척한다.

2、추가소화액은 약 1ml에서 배양병에 넣고 현미경을 거꾸로 놓고 관찰한 후 세포가 움츠러들어 둥글게 변한 후 배양액을 넣어 소화를 중지하고 세포를 가볍게 불어 떨어뜨린 후 현액을 15ml 원심관으로 옮겨 1000rpm 원심 5min;

3、적당량의 동존액으로 세포를 중현시키고 동존관에 놓는다;

4、먼저 세포동존관을-20 ℃ 1.5h, 다음 -80 ℃ 로 이동