SU.86.86인 췌장 도관 암세포

SU.86.86인 췌장 도관 암세포

당사의 모든 제품은 과학 실험만을 제공하며, 기타 과학 실험 외의 사용은 하지 않습니다!

상품 상세 정보:

종속 출처: 사람

성별 나이: 여성,57살

성장 특성: 벽에 붙어서 성장

세포형태: 상피체

세포 사양:1개의 X 106cells/T25또는1ml냉동 보관관

배양 조건:RPMI-1640 + 10% 태아 소 혈액 (FBS) 37℃이산화탄소 5%

냉동 저장 조건:90% FBS + 10% DMSO

전대 방법:1：2에1：3전대,2-4천전1대

세포 배양 조작:

1) 소생세포:다음 세포 배양 냉동 저장 처리는 참고용으로만 제공되며, 구체적인 조작 절차는 납품 제품 설명서를 위주로 한다.

세포현액 1mL를 함유한 동존관을 37℃ 수욕에서 빠르게 흔들어 해동하고 배지 4mL를 더해 골고루 섞는다.1000rpm 조건에서 원심분리 3min, 상청액을 버리고 배지 1~2mL를 첨가한 후 고루 분다.그리고 모든 세포현액을 적당량의 배양기가 함유된 배양병에 넣어 밤을 새운다(또는 세포현액을 6cm그릇에 넣고 약 4mL의 배양기를 넣어 밤을 새운다).셋째 날 환액하고 세포밀도를 검사한다.

2) 세포 대물림:세포 밀도가 80~90%에 달하면 대물림할 수 있다.

a、상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

b、소화액 1mL(0.25% Trypsin-0.02% EDTA)를 배양병에 넣어 소화액을 모든 세포에 적셔 37℃ 배양함에 넣어 1-3min(세포 소화 상태에 따라 다름)을 소화시킨 뒤 현미경으로 세포 소화 상태를 관찰한 뒤 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락하면 신속하게 조작대로 가져가 배양병을 몇 번 두드린 뒤 2-3ml를 넣어 소화를 종료한다.가볍게 골고루 친 후 무균 원심관에 넣고 1000rpm 원심 5min, 맑은 액체를 버리고 1~2mL 배양액을 보충한 후 골고루 분다.

c、세포현액을 1: 2 비율로 배지 8mL를 함유한 새로운 그릇이나 병에 나누어 배지 상자에 넣어 배양한다.

3) 세포 동존:세포의 생장 상태가 양호할 때 세포 동존을 진행할 수 있다.다음 T25병을 예로 들자;

a、세포 및 세포 배양액을 수집해 무균 원심관에 담아 1000rpm 조건에서 4min 원심분리, 상청액 버리고 PBS로 한 번 세척해 PBS를 버리고 세포 계수를 한다.

b、세포의 수량에 따라 무혈청세포동존액을 첨가하여 세포밀도를 5 × 106~1 × 107/mL로 가볍게 혼합하고 매 동존관마다 1mL의 세포현액을 동존하며 동존관에 주의를 돌려 표식을 잘해야 한다.

c、냉동 보관관을 -80 ℃ 냉장고에 넣고 24h 후에 액체 질소 관개 저장에 넣는다.다음에 받을 수 있도록 냉동 보관소의 위치를 기록하세요.

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세포배양 주의사항：

하나,세포를 받은 후 먼저 세포병이 완전한지, 배양액에 누액, 혼탁 등의 현상이 있는지 관찰하고, 상술한 현상이 발생하면 즉시 우리에게 연락하십시오.

2.세포설명서를 자세히 읽고 세포형태, 사용배지, 혈청비례, 필요세포인자 등 세포관련 정보를 료해하여 세포배양조건이 일치하도록 확보하며 만약 배양조건이 일치하지 않아 세포에 문제가 생기면 책임은 고객이 스스로 부담한다.

셋,알코올 75%로 세포병 표면을 닦고 현미경으로 세포 상태를 관찰한다.운송 문제로 일부 세포가 온도 변화 및 격렬한 충돌로 파쇄되어 파편이 형성되는 것은 정상적인 현상이다.세포상태를 잘 관찰한후 75% 의 알콜소독병벽은 T25병을 37 ℃ 배양상자에 놓고 2-4h를 놓는다.

넷째,밀착세포는 소화가 가능하며 부유세포는 직접 혼합하여 세포를 수집하며 900rpm-1000rpm 원심분리 3min, 상청을 버린다.PBS 중현세포 5mL를 더하고 900rpm-1000rpm 원심분리 3min을 더해 신선한 배양기로 중현세포를 중현하고 새로운 배양병이나 배양접시에 접종해 배양함에 넣어 배양한다.

다섯,고객은 동일한 조건의 배양기로 세포 배양에 사용하십시오.

여섯, 고객이 세포를 받은 후 3일 전에 각각 몇 장의 세포 사진을 찍어 세포 상태를 기록하여 우리 회사 기술부와 쉽게 소통하고 교류할 수 있도록 건의한다.운송의 원인으로 인해 개별적인 민감한 세포에 불안정한 상황이 나타날수 있으므로 제때에 우리에게 련락하여 세포의 구체적인 상황을 알려주어 우리의 기술자들이 문제가 해결될 때까지 추적답방할수 있도록 해야 한다.

일곱,이 세포는 과학 연구에만 사용된다.

여덟,비고: 운송용 배지 (관액배지) 는 더 이상 세포를 배양하는 데 사용할 수 없습니다. 설명서 세포배지 조건에 따라 새로 배합한 배지로 바꾸어 세포를 배양하십시오.세포를 받은 후 첫 번째 전대는 1: 2 전대를 권장한다.

9,참고: 1: 2 전대는 T25병 1개, T25병 2개 또는 6cm 그릇 2개를 전하는 것이다.T25병 1개가 아니라 10cm 그릇 2개.