3T3-L1 생쥐 배아 섬유세포 전용 배양기

제품 소개:

3T3-L1 세포 전용 배양기는 기술진이 정교하게 최적화하여 장기적인 테스트를 거쳐 본 제품은 3T3-L1 세포의 좋은 성장 상태를 유지할 수 있다.이 제품에는 이미 3T3-L1 세포의 성장에 필요한 각종 성분이 포함되어 있어 아무런 성분도 첨가할 필요가 없으며 3T3-L1 세포의 체외 배양에 직접 사용할 수 있다.본 제품은 추가 연구용으로만 제공되며 진단, 치료, 임상, 가정 및 기타 용도로 사용할 수 없습니다.

세포 배양의 구체적인 절차:

1. 상용 설비

1. 준비실 설비

단일 증류수 증류기, 이중 증류수 증류기, 실린더, 오븐, 압력밥솥, 저장함 (소독되지 않은 물품 배치), 저장함 (소독된 물품 배치), 포장대.배액실의 설비: 비틀림 저울과 전자 저울(측정 약품),PH는계(측정배양용액PH는값), 자력 믹서 (구성 용액실 믹서 용액).

2. 배양실 설비

액체 질소 탱크, 캐비닛 (잡동사니 보관), 형광등 및 자외선, 공기 청정기 시스템, 저온 냉장고 (-80℃), 에어컨, 이산화탄소 실린더 병, 사이드 스탠드 (실험 기록 쓰기).

3. 반드시 무균 사이에 두어야 하는 설비

원심분리기 (세포 수집), 초정밀 작업대, 거꾸로 현미경,CO2는부화상자(부화배양물), 수욕솥, 삼산소독살균기,4℃냉장고 (배치세럼및 배양용액).

2. 무균조작

(1) 무균실의 멸균

1.정기적으로 무균실을 청소한다: 일주일에 한 번 청소하고, 먼저 수돗물로 바닥을 닦고, 책상을 닦고, 작업대 등을 초정화한 다음 사용한다3‰래술, 뉴제르, 아니면0.5과산화 아세트산 닦기.

2.CO2는부화상자(배양상자) 멸균: 먼저 사용3‰신젤라 지우고75% 알코올 닦기 또는0.5과산화수소에틸렌산을 다시 자외선등으로 비춘다.

3.실험 전 멸균: 자외선, 삼산소살균기, 공기청정기 시스템 각20-30분.

4.실험 후 멸균: 사용75% 알코올 (3‰신젤멸) 초정대, 변대, 거꾸로 현미경을 닦는 적재대.

세포 배양 방법:

01 원대 배양 조작 절차

원대 배양의 조작 절차는 취재이다.→분리→키우다.

（1) 취재: 서로 다른 조직에 대해 서로 다른 취재 방법이 있지만 모두 재료의 신선함과 엄격한 무균을 유지해야 한다.

세포전대배양조작절차는 다음과 같다.

（1) 전대 전에 거꾸로 현미경 아래에서 세포 형태와 생장 밀도를 관찰하여 세포의 생장 밀도가80%~90%이 경우 대물림을 진행할 수 있습니다.

（2) 배양병 안의 배양액을 빨아들이거나 쏟는다.가입PBS는세척1~2회, 좌우로 가볍게 흔들어 버린다.

（3) 배양병 크기에 따라 병에 적당량을 넣는다EDTA는네, 일반적으로 배양병 바닥 전체를 덮어야 합니다.

（4) 배양병을 넣는다37℃ 이산화탄소배양함 소화,2~5분나중에 꺼내 거꾸로 된 현미경 아래에 놓고 관찰하다가70%~80%세포의 수축이 둥글어지고 세포 간극이 커지면 배양병을 가볍게 두드려 남은 세포를 탈락시킨 다음 즉시 첨가한다2배양의 배양액은 소화를 중지하고 흡두를 사용하여 가볍게 불고 골고루 섞어 소화가 과도하지 않도록 한다.

（5) 모든 세포 현액을 원심관 안으로 빨아들이고,1000rpm/분원심3~5분。

（6) 상청을 버리고 적당량의 배양액을 첨가하여 중현세포를 가볍게 불어 섞어 세포를 균일하게 분산시킨다.

（7) 흡입으로 적당량의 세포현액을 흡수하여 적당한 밀도로 새로운 배양병에 접종하고 배양액을 보충하여 고르게 흔들어 놓는다37℃ 이산화탄소배양함에서 배양하다.

（8) 세포의 성장상태에 따라 환액이나 전대시간을 확정하고 심지어 세포동존까지 진행한다.

주의사항:

（1) 무균 조작을 엄격히 진행하고, 사용하는 모든 시약 및 소모품은 무균이어야 하며, 반드시 무균 초정 작업대에서 자외선을 조사해야 한다30분이상, 세포에 오염이 발생하지 않도록.

（2) 사용하는 배양액은 반드시 세포의 생존과 생장에 적합해야 한다.동물의 종류, 조직 유형에 따라 세포가 유래해 배양액에 대한 요구가 다르며 필요할 경우 사전 실험을 통해 적절한 배양액을 선택할 수 있다.

（3) 태우 혈청은 세포의 생존을 유지하고 세포의 성장을 촉진하는 데 중요한 역할을 한다.문헌이나 예실험에 근거하여 적합한 태우혈청을 선택할수 있다.일단 확정되면 실험이 끝날 때까지 계속 사용해야 한다.

（4) 세포를 소화할 때는 소화시간이 너무 짧아 소화가 되지 않도록 해야 한다. 수집된 세포의 수량이 적거나 소화시간이 너무 길어 세포가 덩어리 모양의 솜모양으로 유리되는 것을 피해야 한다. 이때의 세포는 이미 손상되거나 사망하여 세포의 수량과 실험진도에 영향을 준다.

（5) 세포가 원심을 분리할 때는 원심력이 너무 작아 수집된 세포의 수가 부족하거나 원심력이 너무 커서 세포에 손상을 주는 것을 피해야 한다.원심후의 세포침전은 상청을 제거한후 먼저 세포침전을 탄산한후 다시 배양액을 첨가하여 중현해야 한다. 이렇게 하면 직접 불는것보다 세포에 대한 손상이 적고 세포활률을 높일수 있다.

（6) 세포를 불어 때릴 때는 세포가 손상되지 않도록 가능한 한 세포의 생성을 피해야 하며, 세포 상태에 영향을 주어야 한다 (불어 때리는 과정에서 남아 있는 일부 액체는 흡두 내에서 기포의 생성을 줄일 수 있다).

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