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보조효소Ⅰ NAD(H) 함량 측정함 미량법

협상 가능업데이트02/19
모델
제조업체의 성격
생산자
제품 카테고리
원산지 Place of Origin
개요
재조합 효소 Ⅰ NAD (H) 함량 테스트 박스 미량법 회사가 판매 중인 제품: IgG-Fc 세그먼트 저친화력 수용체 Ⅲ b (Fc 감마 R3B) 재조합 단백질 Recombinant Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIb Receptor (FcgR3B) Juxtanodin 단백질 (JN) 샘플 Krodin Recombin4
제품 정보

본 시약함은 연구 사용 회사 실험실에서만 무료 대리 측정, 7개의 작업 일출 결과, 원시 데이터 제공!

제품명 규격 검사 방법 품번
보조효소Ⅰ NAD(H) 함량 측정함 미량법 100관 / 48종 미량법 BK-S01321은

상품 소개:

의의를 측정하다
동물, 식물, 미생물 및 배양 세포에 널리 존재하는 보조효소 Ⅰ NAD (H) 는 당효소 (EMP) 와 트리카르복실산 순환 (TCA) 의 주요 수소 수용체이며, 생성 된 NADH는 호흡 전자 사슬 (ETC) 을 통해 전자를 산소에 전달하고 ATP를 합성하면서 큰 양의 ROS를 형성하며 NADH는 NAD +로 재생됩니다.설탕, 지방, 단백질의 3대 대사물질 분해 중 산화반응의 절대다수가 이 체계를 통해 이루어진다.NAD(H) 함량과 NADH/NAD+ 비율의 높낮이는 당효해와 TCA 순환의 강약을 평가하는 데 사용할 수 있다.높은 NAD(H) 및 NADH/NAD+ 비율은 세포의 호흡 산소 소비량이 높고 과산화 상태라는 것을 의미한다.또한 NADH/NAD+ 비율이 높아지면 당효해와 TCA 순환도 억제할 수 있다.또 NAD+ 분해 산물은 세포 신호 전도, 대사, 유전자 발현 등에 중요한 조절 작용을 한다.
측정 원리
각각 산성과 알칼리성 추출액으로 시료 중 NAD +와 NADH를 추출하고, NADH는 PMS의 수소 전달 작용을 통해 산화형 티아졸람(MTT)을 갑으로 환원해 570nm에서 흡광값을 측정한다.NAD + 는 에탄올 탈수소 효소에 의해 NADH로 환원될 수 있으며, 더 나아가 MTT 환원법으로 검사된다.
자체 의 기기 와 용품 이 필요 하다
가시 분광 광도계/효소 측정기, 탁상 원심분리기, 이액기, 미량 석영 비색 그릇/96공판, 연구발, 얼음과 증류수.

시약 구성 및 조제:

추출액: 액체 100mL×1병, 4℃ 보관.

시약 1: 액체 5mL×1병, 4 ℃ 피광 보존.

시약 2: 액체 15mL×1병, 4 ℃ 보존.

시약 3: 액체 3mL×1병, 4 ℃ 보존.

시약 4: 액체 3mL×1병, 4 ℃ 보존.
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실험 결과는 나에게 묘수가 있다고 판단했다.
1. 정량측정결과는 표준곡선에 근거하여 견본중의 측정대기물의 함량을 계산한다.
2. 샘플 구멍의 OD값이 음성 대조 OD값 + 2~3SD보다 큰 것을 양성 결과의 임계값으로 한다.
3. P/N 값(양성 구멍 OD값/음성 구멍 OD값)이 2.1보다 크거나 같으면 양성, P/N 값이 2.1보다 작지만 1.5보다 크면 의심, P/N이 1.5보다 작으면 음성이다.
4. ELISA 시약함목 측정성법: 바탕물을 첨가하여 효소분해와 종지반응을 거친후 육안으로 관찰한 양성공의 색갈은 (경쟁법칙이 음성대조보다 얕음) 음성대조보다 뚜렷이 깊고 음성대조의 색갈과 가까운 사람은 음성으로 판정한다.
자주 사용하는 불안정 시약의 분류 및 요구 사항을 공유합니다.
① 쉽게 휘발되고 저연소되는 시약은 밀봉하여 그늘지고 통풍이 잘 되며 화원에서 멀리 떨어져 보존하여야 한다.
② 수증기, 물과 반응하는 물질은 밀봉하고 수원에서 멀리 보존한다.
③ 산소작용이 쉬운 시약은 고체 또는 결정체를 밀봉하여 보존해야 하며, 그 수용액, 아황산, 수소황산 용액을 장기간 보관하는 것은 적합하지 않으며, 칼륨, 나트륨, 백린은 더욱 액봉형식으로 보관해야 한다.
④ 이산화탄소에 반응하는 물질은 밀봉하여 보존해야 하며, 그에 상응하는 용액은 고체보다 반응하기 쉬우므로 밀봉하여 보존하는 것에 더욱 주의해야 한다.
⑤ 쉽게 휘발되거나 스스로 분해되는 시약은 밀봉하여 서늘하고 통풍이 잘 되는 곳에 보관한다.

작업 단계:

1. 샘플의 준비:

a. 세포 샘플의 준비: 세포를 수집하고 4 ℃ 또는 얼음 목욕으로 미리 차가운 PBS 또는 생리 식염수로 1~2 번 씻습니다.침전용예냉조직세포분해액 4 ℃ 또는 빙욕균장 (유리균장기나 각종 흔히 볼수 있는 전동균장기를 사용할수 있다.)그 후 균일한 장액은 4 ℃ 원심에서 분리되어 측정을 기다리는 샘플로 채취되었다.

b. 조직 샘플의 준비: 동물용 생리식염수(0.9% NaCl, 0.16mg/ml 함유) 관류로 혈액을 제거한 후 조직 샘플을 얻는다.100mg당 500-1000ul의 조직세포분해액을 첨가한 비례에 따라 4 ℃ 또는 빙욕균장 (유리균장기나 각종 흔히 볼수 있는 전동균장기를 사용할수 있다.)그 후 균일한 장액은 4 ℃ 원심에서 분리되어 측정을 기다리는 샘플로 채취되었다.

d. BCA 단백질 농도 측정 키트(P1511)를 사용하여 단백질 농도를 측정한다.보통 10-20ug 단백질의 세포 또는 조직 균장액 샘플에서 SOD의 평균 활력은 약 1 개의 활력 단위 정도입니다 (세포와 조직에 따라 차이가 크며 이 활력 범위는 초보적인 참고로 사용됩니다).각 샘플은 일반적으로 후속 검사에 사용하기에 충분한 20-100 ug 단백질을 준비합니다.

e. 단백질 농도와 예상 단백질 사용량에 따라 시약함에서 제공하는 SOD 검사 완충액으로 시료를 적절히 희석한다.예를 들어, 쥐의 간은 일반적으로 10-100 배 희석되어야합니다.준비된 시료는 당일 측정하면 빙욕으로 보관할 수 있다.만약 당일 측정을 완료하지 못하면 -70℃ 동존할 수 있지만, 가능한 한 당일 측정을 완료할 것을 권장한다.

2. 시약함 준비:

a.WST-8 효소 작업액의 조제: 아래 표를 참조하여 검사 대기 샘플 (표준품 포함) 수량에 따라 적당량의 WST-8 효소 작업액을 조제하고, 조제된 WST-8 효소 작업액은 4 ℃ 또는 빙욕으로 보존하며, 당일 사용할 수 있지만, 가능한 한 즉시 사용할 것을 권장한다.

주의: 효소 용액의 사용량이 적고 가라앉기 쉬우므로 사용하기 전에 먼저 가볍게 원심을 분리한 후 적당히 섞은 후에 사용하는 것을 주의해야 한다.

b. 반응 시동 작업액 조제: 시약함에서 제공하는 반응 시동액(40X)을 용해한 후 골고루 섞어 1μl 반응 시동액(40X)에 39μl SOD 검사 완충액을 첨가한 비율로 희석한다. 즉 반응 시동 작업액이다.4 ℃ 또는 빙욕으로 보존하여 당일 사용할 수 있지만 가능한 한 즉시 배합하여 사용하는 것을 권장한다.

c. (선택 사항) SOD 표준품 준비: 자체 SOD 표준품을 준비하고, 본 시약함에서 제공한 희석액으로 SOD 표준품을 다음과 같은 계열 농도로 희석한다: 20U/ml, 10U/ml, 5U/ml, 2.5U/ml, 1.25U/ml, 0.625U/ml.그 후의 검사에서 각각 20마이크로리터를 채취하여 샘플을 참고하여 검사할 수 있다.설명: 희석 후 SOD 효소의 활성이 떨어지지 않도록 SOD 표준품은 희석하여 사용하는 것이 좋다;이 키트는 SOD 검사에 대해 SOD를 표준품으로 사용할 필요는 없지만, SOD 표준품을 양성 대조 또는 SOD 활성 정량에 대한 참고로 사용할 수 있다.

AHA3 AHA3 항체(의남개)

Phospho-ATP1A1 (Ser23) 인산화 나트륨 칼륨 ATP 효소 단백질 a1 항체

phospho-ASK1 (Ser83) 인산화 세포 사멸 신호 조절 효소 1 항체

AADACL1 중성 에스테르 분해효소 1 항체

Astrocyte 인간 성형 콜라겐 세포 항체

Aldolase A 알데히드 축소 효소 A 항체

Annexin VI 막 접착 단백질 6 항체

beta-Amyloid(25-35) 베타 아밀로이드(25-35) 항체

Angiotensin I 혈관 긴장소 I 항체

Adrenomedullin 아드레날린 항체(N단 20 펩타이드)

Arfaptin 2 ADP 리보핵화 인자 결합 단백질 2 항체

AVPR2 가압제 수용체 2 항체

ASC 사망 관련 스펙트럼 단백질 ASC 항체

Afadin 실크 근동 단백질 결합 단백질 항체

Antithrombin III는抗3抗体

Serum albumin (3F4) 인혈청백단백질단클론항체

CUB 밴드 부스럼 투명 영역 단백질 1 (CUZD1) 재조합 단백질 Recombinant CUB And Zona Pellucida Like Domains Protein 1 (CUZD1)

C-형 응집소 도메인 패밀리 11 멤버 A (CLEC11A) 재조합 단백질 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)

C-형 응집소 도메인 패밀리 2 멤버 C (CLEC2C) 재조합 단백질 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C)

데르모킨 단백질(DMKN) 재조합 단백질 Recombinant Dermokine(DMKN)

Dickkopf 관련 단백질 2(DK2) 재조합 단백질 Recombinant Dickkopf Related Protein 2(DK2)

Discs 대동원물연관단백질5(DLGAP5) 재조합단백질 Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5(DLGAP5)

EGF 샘플 단백질 6 (EGFL6) 재조합 단백질 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 6 (EGFL6)

EGF 샘플 단백질 7 (EGFL7) 재조합 단백질 Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)

Enah/Vasp 프로테인(EVL) 재조합 단백질 Recombinant Enah/Vasp Like Protein(EVL)

FK506 결합 단백질 샘플 단백질(FKBPL) 재조합 단백질 Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein(FKBPL)

보조효소Ⅰ NAD(H) 함량 측정함 미량법FMS 샘플 Flt3) 재조합 단백질 Recombinant FMS Like Tyrosine Kinase 3 (Flt3)

GATA 결합 단백질 3 (GATA3) 재조합 단백질 Recombinant GATA Binding Protein 3 (GATA3)

GATA 결합 단백질 4 (GATA4) 재조합 단백질 Recombinant GATA Binding Protein 4 (GATA4)

G 단백질 짝짓기 수용체 가족 C5 그룹 구성원 A (GPRC5A) 재조합 단백질 Recombinant G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A (GPRC5A)

HtrA肽酶1 (HTRA1)重组蛋白 재조합 HtrA 세린 재재재조합 재재재조합 HtrA 재재재조합 HtrA 세린 재재조합 재재조합 재재재재조합 HtrA 세린 재

HtrA4(HTRA4) 재조합 단백질 Recombinant HtrA Serine Peptidase 4(HTRA4)