TRzol(총 RNA 추출 시약)

TRzol(총 RNA 추출 시약)

제품 설명:

TRzol 시약은 세포나 조직에서 총 RNA를 직접 추출하는 시약이다.그것은 세포를 분쇄하고 용해할 때 RNA의 완전성을 유지할 수 있다.클로로포름을 넣은 후 원심을 분리하면 샘플은 물 샘플층과 유기층으로 나뉜다.RNA는 물 표본층에 존재합니다.위의 물 샘플층을 수집하면 RNA는 이소프로필알코올 침전을 통해 회수할 수 있다.

사람, 동물, 식물, 세균 조직을 막론하고 이 방법은 소량 및 대량의 조직과 세포에 모두 비교적 좋은 분리효과가 있다.TRzol 시약의 조작상의 단순성을 통해 여러 개의 시료를 동시에 처리할 수 있습니다.모든 작업은 1시간 이내에 완료할 수 있습니다.TRzol에서 추출한 총 RNA는 DNA와 단백질의 오염을 피할 수 있다.따라서 RNA 자국 분석, 반점 교잡, poly (A) + 선택, 체외 전사, RNA 효소 보호 분석 및 분자 복제를 할 수 있습니다.

TRzol 시약은 서로 다른 종속의 서로 다른 분자량 크기의 다양한 RNA의 석출을 촉진할 수 있다.예를 들어, 쥐의 간에서 추출 된 RNA는 글리세린 겔을 통해 전영하고 브롬화 에틸 주괴로 염색되어 7 kb와 15 kb 사이의 불연속 한 많은 고분자량 스트립 (mRNA와 hnRNA 성분), 두 개의 우세 한 리보카도 ~5 kb (28S) 와 ~2kb (18S), 저분자량 RNA는 0.1 과 0.3 kb (tB), RNA) 사이에 있습니다.추출된 RNA가 TE로 희석되었을 때 그 A 260/A 280 비율 ≥ 1.8.

제품 저장: TRzol은 실온에서 12개월 동안 안정적으로 보관할 수 있습니다.그럼에도 불구하고 좋은 효과를 얻기 위해서는 2-8 ℃ 의 환경에 보관하는 것이 좋습니다.(구체적인 조작은 설명서 참조)

1. 템플릿 DNA: PCR 반응은 세포, 조직, 혈액에서 DNA를 추출하는 등 템플릿 DNA가 필요하다;

2. 유인물: PCR이 반응하는 두 개의 유인물은 각각 템플릿 DNA의 양쪽 끝과 페어링하여 증폭하는 데 필요한 특정 영역이며, 유인물도 TA 클론 등 과정에서 사용되는 유인물로 합성할 수 있다;

3. dNTPs: PCR 반응에는 디옥시아드레날린 (dATP), 디옥시아드레날린 (dCTP), 디옥시아드레날린 (dGTP), 디옥시아드레날린 (dTTP) 을 포함한 네 가지 dNTPs가 필요하며, 세포 분열, DNA 합성 등 생물학 과정에 사용되며, PCR 증폭의 템플릿 DNA 사슬의 확장과 증폭에 사용된다;

4. Taq DNA 중합 효소: PCR 반응에 필요한 중합 효소, 일반적으로 Taq 중합 효소를 사용하며, PFU, Phusion 등 일부 다른 종류의 중합 효소는 DNA 사슬을 증폭시키는 데 사용된다;

5. PCR buffer 용액: PCR 반응에 완충 작용을 가지고 조절 반응 pH, 황대황산수소염 SDS, 소분자 유기화합물 예를 들면 포름알데히드는 PCR 반응 특이성을 증강시켜 반응 효율을 높일 수 있다;

6. 효소 절단 체계: PCR 증폭은 종종 재조합, 구축 및 시퀀싱 등 실험 절차와 관련되며, 종종 효소 절단 조작을 진행해야 한다.

7. MARK: DNA 조각의 크기를 판별하는 도구인 분자량 기준.

8. DNA 순화 시약함: PCR 반응 산물을 순화하는 데 사용한다;

나체죽; 올리고DT
Oligo dT를 선택할 때는 RNA에 Poly A가 있어야 하므로 진짜 핵 생물의 mRNA가 모두 적용됩니다.긴 사슬 심지어 전체 길이 mRNA에 적합한 RT는 RNA 샘플의 품질에 대한 요구가 높으며 뚜렷한 DNA 오염, RNA 분해 및 RNA 단절이 없어야 한다.RT 반응을 위해 새로운 mRNA를 탐색하고 싶다면 Oligo dT 유인물을 사용하는 것이 좋습니다.Oligo dT 유인물을 사용하는 것은 무작위 유인물과 특이성 유인물보다 안정성이 좋다.
② 무작위 유인물
다양한 RNA에 적합한 RT는 특히 템플릿의 풍도가 매우 낮은 경우 (예를 들어 어떤 gene 표현량이 매우 낮음) 에 적합합니다.무작위 유인물을 선택할 때 체인 cDNA 합성 반응에서는 모든 RNA를 템플릿으로 한 다음 PCR 반응을 할 때 유인물을 설계하여 특이성 증폭을 하는 것이다.동시에 무작위 유인물의 양과 총 RNA량 사이의 관계에 주의해야 한다. 일반적으로 총 RNA 5µg당 무작위 유인물의 사용량은 50ng이 권장된다. 총 RNA 5µg당 무작위 유인물의 사용량이 250ng을 초과하면 작은 조각 산물 (<500bp) 의 증가와 긴 조각, 전체 길이 산물의 감소를 초래할 수 있다.
③ 특이성 유인물
유전자 특이성 유인물 (GSP) 은 어떤 유전자 서열의 일부로 템플릿과 상호 보완되는 유인물이다.이 유인물은 대상 RNA의 알려진 시퀀스와 결합하여 설계되어야 합니다.유인물과 RNA 서열 특이성의 결합으로 인해 각 대상 RNA에는 새로운 유전자 특이성 유인물 세트가 필요합니다.따라서 다양한 목표를 분석할 때 더 많은 RNA 샘플을 적용해야합니다.또한 유인물에 따라 퇴화 온도가 워낙 다르기 때문에 일반적으로 사용을 권장하지 않는다.특이성 유인물을 사용해야 할 경우 퇴화 온도를 최적화하는 것이 좋습니다.