쥐 원대 흉선 섬유세포 전용 배양기

상품 설명:

팀이 정성껏 최적화하여 장기적인 테스트를 거쳐 본 제품은 쥐의 원대흉선성섬유세포의 량호한 생장상태를 유지할수 있다.

이 제품에는 이미 쥐원대흉선성섬유세포의 생장에 필요한 각종 성분이 포함되여있으며 아무런 성분도 첨가하지 않고 직접 쥐원대흉선성섬유세포의 배양으로 할수 있다.

제품 주성분

운송 및 보존

운송:바이오 아이스팩이 포함된 인슐레이션 상자에 저온 배송

保存方法: 해당 보존조건에 따라 12개월 보존하고 배치된 배양기 2 ℃ ~8 ℃ 를 2개월 보존한다.

품질 관리

주의사항:

과학 연구용으로만 한정하다.

배양체계 중 일부 성분은 인체 건강에 해로운 물질이므로 노출된 피부로 배양체계의 액체와 배양체계가 있는 액체가 남아 있는 용기 내부에 접촉하지 마십시오.이 부분의 유해물질은 농도와 위해성이 모두 낮아 접촉이 있으면 즉시 수돗물로 씻어내면 된다.

세포 배양 단계:

1. 배양기 및 배양냉동저장조건준비:

1) DMEM-H 배양기 준비(NaHCO3 1.5g/L 추가), 90%;태우 혈청, 10%.실험의 필요에 따라 부유배지를 선택하여 293T 세포를 부유하게 성장시킬 수도 있다.

2) 배양조건: 기상: 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 섭씨 37도, 배양함 습도는 70~80% 입니다.

3) 동존액: 90% 배양기, 10% DMSO, 현용 현배.액체 질소 저장.

2. 세포 처리:

1) 소생세포: 세포현액 1mL를 함유한 동존관을 37℃ 수욕에서 빠르게 흔들어 해동하고 배지 4mL를 넣어 골고루 섞는다.1000RPM 조건에서 4분간 원심을 분리하고 상청액을 버리고 1-2mL 배양기를 보충한 후 골고루 분다.그리고 모든 세포현액을 배양병에 넣어 밤을 새운다(또는 세포현액을 10cm그릇에 넣고 약 8ml의 배양기를 넣어 밤을 새운다).다음 날 환액하고 세포밀도를 검사한다.

2) 세포 대물림: 세포 밀도가 80~90% 에 달하면 대물림 배양을 할 수 있다.

밀착 세포의 경우 전대는 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다.

1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

2.소화액 2ml (0.25% Trypsin-0.53mM EDTA) 을 배양병에 넣고 37 ℃ 배양상자에 넣어 1~2분 동안 소화시킨 다음 현미경으로 세포의 소화 상황을 관찰한다. 만약 세포가 대부분 둥글게 변하고 탈락하면 신속하게 조작대로 가져가 배양병을 몇 번 두드린 후 소량의 배양기를 넣어 소화를 종료한다.

3. 6-8ml/병에 따라 배양기를 보충하고 가볍게 두드린 후 빨아들여 1000RPM 조건에서 4분간 원심을 분리하고 청액을 버리고 1-2mL의 배양액을 보충한 후 고루 분다.

4. 세포현액을 1:2에서 1:5의 비율로 배지 8ml를 함유한 새 그릇이나 병에 나눈다.

3) 세포동존: 세포의 생장상태가 양호할 때 세포동존을 진행할 수 있다.붙박이 세포가 동존할 때는 배지를 버리고 소량을 넣어 세포가 둥글게 떨어져 나간 뒤 혈청 함유 배지 약 1ml를 넣은 뒤 동존관에 넣고 DMSO 10%를 추가한 뒤 동존한다.

세포를 냉동 보존하는 방법?

냉동보관방법 1: 냉동관을 4℃ 30~60분→(-20℃ 30분*)→-80℃ 16~18시간(또는 격야)→액체질소탱크 vaporphase에 넣어 장기간 보관한다.

냉동 보존 방법 2: 냉동관은 이미 설정된 프로그램의 프로그램 가능한 냉각기에 설치하여 분당 1-3 ℃ 에서 -80 ℃ 이하로 내린 다음 액체 질소 슬롯 vapor phase에 넣어 장기간 저장한다.-20 ℃ 는 1시간 이상 얼음 결정이 너무 커서 세포가 대량으로 죽는 것을 방지할 수 없으며, 이 단계를 건너뛰고 -80 ℃ 냉장고에 직접 넣을 수도 있지만, 생존율은 약간 낮아진다.

회사에서 판매 중인 제품:

1) 배양기를 37℃ 수욕솥에 예열한다.15mL 무균의 원심관을 준비하고 예열배지 8mL를 넣는다.

2) 액체 질소 탱크에서 냉동 세포를 꺼내어 37 ℃ 의 수욕솥에 빠르게 넣고 복온한다 (깨끗한 비커를 준비하여 37 ℃ 의 물을 가득 채울 수 있다. 세포 냉동 보관관을 꺼낸 후 신속하게 비커에 넣은 후 점차 수욕솥으로 옮긴다).냉동 보관소를 가볍게 흔들어 세포가 1~2min 이내에 해동될 수 있도록 하고, 세포가 손상되기 쉬운 온도 구간(-5~0℃)을 빨리 통과할 수 있도록 한다.냉동보관관 관구가 물에 들어가지 않아야 하며 오염을 일으키지 않도록 주의해야 한다.

3) 75% 알코올로 냉동보관소를 닦은 후 다시 초정대 안에 놓고 관내 세포를 준비된 원심관 안으로 옮겨 액체를 가볍게 불어 세포를 균일하게 분산시켜 DMSO 농도를 낮추고 불 때 기포가 생기지 않도록 한다.신선한 배양기로 파이프 벽을 2회 씻어 모두 원심관 안으로 옮긴다.

4) 800rpm 원심분리 5min, 상청을 버리고 신선한 배양기를 넣고 불어서 세포현액으로 만든다.

5) 세포현액을 T25 세포병에 옮겨 적당량의 배양기를 보충하고 세포병을 가볍게 흔들어 세포분포를 균일하게 하고 온상자에 넣어 배양한다.

6) 다음 날 세포의 밀착 생장 상황을 관찰하고 신선한 배양기로 바꾸어 죽은 세포를 제거한다.계속 배양하고 세포가 80~90% 까지 자라면 합류할 때 정상적으로 대물림된다.일반적으로 갓 소생한 세포는 2~3회 대물림을 거쳐 세포의 활력이 회복된 후에야 후속 실험을 진행할 수 있다.