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사람 브루셀라병 항체(Brucellosis Ab) ELISA 키트 사용 설명서
날짜:2024-10-30읽기 :1

이 키트는 연구용으로만 제공됩니다.

96T는

사용 목적:

이 키트는 측정에 사용됩니다.사람혈청, 혈장 및 관련 액체 샘플 중브루셀라병항체(브루 ( Brucellosis Ab)표현

실험 원리

본 시약함 응용 더블항원협심법 측정표본인간 브루셀라병항체(브루 ( Brucellosis Ab)표현순화된 것으로항원가방은 마이크로 패널로 고정되어 있다항원샘플 중브루셀라병항체(브루 ( Brucellosis Ab)결합세척을 거쳐 결합되지 않은 항체와 기타 성분을 제거한 후재대HRP는표식의항원결합하여 항원을 형성하다-항체-항원 복합체, 세탁 후더하다바탕TMB는발색하다.TMB는에서HRP는효소의 촉매로 파란색으로 변하고 산의 작용으로 최종 노란색으로 변한다.효소 측정기로450nm파장에서 흡광도 측정(OD는값), 및CUTOFF는값 을 비교하여 표본 중 을 판정 하다인간 브루셀라병항체(브루 ( Brucellosis Ab)의 존재 여부.

시약함 구성

1

30배농축 세척액

20ml×1

7

종지액

6ml×1

2

효소 표적 시약

6ml×1

8

양성 대조

0.5ml의×1

3

효소패키지 레이블

12구멍 ×8

9

음성 대조

0.5ml의×1

4

견본희석액

6ml×1

10

설명서

1

5

발색제A액체

6ml×1

11

봉판막

2

6

발색제B액체

6ml×1/

12

봉지

1

표본 요구 사항

1표본 채집 후 가능한 한 빨리 추출하고, 추출은 관련 문헌에 따라 진행하며, 추출 후 가능한 한 빨리 실험을 진행해야 한다.당장 실험을 진행하지 못하면,표본을-20℃ 보존, 그러나반복되는 얼음 녹는 것을 피하다

2. NaN3이 포함된 샘플은 검사할 수 없음, 인NaN3은매운 뿌리 과산화물 효소를 억제하는 (HRP는) 활성.

작업 단계

  1. 번호: 샘플을 미세 구멍에 대응하여 순서대로 번호를 매기고, 판마다 음성 대조를 설정해야 한다2구멍,양성 대조2구멍, 공백 대조1구멍 (공백 대조 구멍은 시료 및 효소 표시 시약을 넣지 않으며 나머지 단계는 동일)

  2. 샘플링: 각각 음, 양성 대조 구멍에 음성 대조, 양성 대조를 첨가한다50μl. 그리고테스트 대기 샘플 구멍먼저 샘플 희석액을 첨가하다.40μl그런 다음 테스트 대기 샘플을 추가합니다.10μl샘플링은 효소 표지판 구멍 밑부분에 샘플을 추가하여 구멍 벽에 닿지 않도록 합니다.살살흔들다혼합,

  3. 온육: 봉판막으로 봉판 후치37℃ 온육30

  4. 배액:30배농축 세척액용 증류수30예비 용량을 배로 희석하다.

  5. 세탁: 봉판막을 조심스럽게 벗기고 액체를 버리고,뿌리치다, 구멍마다 세척액을 가득 채워 고정30초 후 포기, 이렇게 반복5다음, 찍어서 말려라.

  6. 효소 첨가: 구멍마다 효소 표적 시약 첨가50μl, 빈 구멍 제외

  7. 온육: 조작 동일3

  8. 세탁: 조작 동일5

  9. 발색: 구멍마다 발색제를 먼저 넣는다A50는μl, 발색제 추가B50는μl, 가볍게 흔들어 섞고,37℃ 는 빛을 피하여 15분간 발색한다.

  10. 종료: 구멍당 끝액체50μl, 중지 반응(이때 파란색은 노란색으로 바뀝니다.)

  11. 측정: 빈 구멍으로 0,450nm파장은 순서대로 각 구멍의흡광도 (OD는값) 측정은 종지액을 넣은 후에 해야 한다15분 내로 진행하다.

    계산 및 결과 판정:

    시험 유효성: 양성 대조공 평균치1.00;음성 대조 평균치0.20

    임계값 (절단) 계산: 임계값=음성 대조공 평균치+0.15

    음성 판정: 샘플OD는< 임계값 (절단)자는브루셀라병항체(브루 ( Brucellosis Ab)음성

    양성 판정: 샘플OD는 임계값 (절단)자는브루셀라병항체(브루 ( Brucellosis Ab)양성

    주의사항

    1.조작은 엄격히 설명서에 따라 진행되며 본 시약의 부동한 로트번호는 혼용해서는 안된다.

    2.시약함은 냉장 환경에서 꺼내면 실온에서 균형을 맞춰야 한다15-30분 후에 사용할 수 있으며, 효소 표지 가방은 판에 의해 개봉된 후 다 쓰지 않으면 판자는 밀봉 봉지에 넣어 보존해야 한다.

    3진한 세척액가능있을 거야결정석출, 희석 시 수욕 중 가온 보조 용해 가능, 세탁 시 결과에 영향을 주지 않습니다.

  12. 봉판막은 교차 오염을 피하기 위해 일회용으로만 사용할 수 있다.

    5.바탕은 빛을 피하여 보존하십시오.

    6.시험결과 판정은 반드시 효소표시기의 판독수를 기준으로 하며 이중파장검측을 사용할 때 참고파장은630nm

    7모든 시료, 세척액과 각종 폐기물은 전염물에 따라 처리해야 한다.종료액은2M의 황산은 사용 시 반드시 안전에 주의해야 한다.

    저장 조건 및 유효기간

    1키트 보관:2-8

    2. 유효기간:6개월